Replikimi i virusit të gripit ndodh në. Viruset e gripit dhe gripi. Kultivimi dhe riprodhimi
![Replikimi i virusit të gripit ndodh në. Viruset e gripit dhe gripi. Kultivimi dhe riprodhimi](https://i1.wp.com/bio-faq.ru/zzz/zzz010_clip_image004.jpg)
Adsorbimi
I famshëm "H5N1" qëndron për "hemaglutinin tipi pesë, neuraminidaza e tipit një" - këto dy proteina ngjiten në sipërfaqen e virusit të influencës (në Fig. 1, hemagglutinina është e gjelbër dhe neuraminidaza është gri).
Me ndihmën e hemaglutininës, virusi i gripit ngjitet në receptorët në sipërfaqen e qelizave. Objektivi fillestar i virusit janë qelizat e epitelit ciliar të traktit respirator, por kjo nuk është arsyeja pse ne e duam atë: hemagglutinina mund të ngjitet në receptorët e shumë qelizave të tjera, duke përfshirë qelizat e kuqe të gjakut. Nëse një virus ngjitet në dy qeliza të kuqe të gjakut në të njëjtën kohë, qelizat e kuqe të gjakut do të ngjiten së bashku! Prandaj emri i proteinës - "ngjitja e gjakut".
oriz. 1
Zbatimi
Qeliza budalla thith virusin që është ngjitur me të nga fagocitoza - ashtu si e ha. Pse, pse fëmijët fusin gjithmonë në gojë lloj-lloj gjërash të këqija?! Megjithatë, virusi është ende brenda qelizës si ushqim, brenda një vezikule fagocitotike (në Fig. 2 - "endosome"). Endosomi bashkohet me lizozomin, formohet një vakuol tretëse, protonet pompohen në të nga citoplazma për të krijuar një mjedis acid (ky proces tregohet në Fig. 2) - pak më shumë, dhe ne do ta tretim virusin (me fjalët "ushqim proteinik, cili është ndryshimi").
![](https://i1.wp.com/bio-faq.ru/zzz/zzz010_clip_image004.jpg)
oriz. 2
Rrish
Por virusi është gati për këtë kthesë të ngjarjeve:
![]() oriz. 3 |
- Hemaglutinina modifikohet nën ndikimin e një mjedisi acid - sipërfaqja e saj bëhet hidrofile, dhe ajo (e lidhur më parë me receptorin në sipërfaqen e brendshme të membranës endozome, tani) është ngulitur brenda kësaj membrane.
- Protonet e pompuara në endozomë kalojnë përmes proteinave të kanaleve speciale (proteinat M2, të treguara në Fig. 1 dhe Fig. 3) përmes guaskës lipidike të virusit dhe arrijnë në shtresën proteinike të virusit (në Fig. 1 - një rreth topash të bardhë - Proteinat M1). Për shkak të kësaj, guaska proteinike shkatërrohet (në Fig. 3, proteinat M1 të guaskës së proteinës së shkatërruar tregohen si yje të kuq).
- Mbështetja lipidike e virusit (për shkak të veprimit depërtues të hemagglutininës) bashkohet me membranën (lipidike) të fagozomit; ARN-ja e virusit përfundon në citoplazmën e qelizës.
Replikimi i virusit
ARN-ja e virusit e lëshuar në citoplazmë është në vetvete plotësisht e sigurt.
- Mbi të nuk mund të bëhen proteina, sepse është minus ARN (proteinat nuk kodohen prej saj, por nga vargu plotësues plus, i cili ende nuk ekziston).
- Është gjithashtu e pamundur të bëhet ARN në të - qelizat tona përgjithësisht nuk kanë një enzimë të aftë për të dyfishuar ARN-në.
"Oh-ho-ho, ti nuk ke asgjë," murmuritet virusi i gripit, duke tundur kokën me mustaqe, "por nuk ka problem, unë solla gjithçka me vete." Virusi solli me vete proteinat PB1, PB2 dhe PA, të cilat së bashku formojnë polimerazën e ARN-së virale të varur nga ARN - mund të dyfishojë ARN-në. Por fat i keq! Çdo polimerazë ka nevojë për një abetare për të filluar punën, por gripi harrues nuk e mori me vete! Gjithçka ka mbaruar?!
Qetësohu, mos u frikëso! - Me këto fjalë e gjithë shoqëria (8 ARN virale dhe 3 enzima virale) dërgohet në bërthamën e qelizës. Atje gripi merr shërbim të plotë:
- primerët për replikimin e ARN-së virale (për të marrë plus ARN) janë seksione të shkëputura nga ARN-ja qelizore;
- përpunimi: seksione që shërbyen si abetare për sintezën e ARN-së - këto ishin kapakë, kështu që modifikimi i skajit 5" u krye që në fillim; në fund të sintezës, ndodh poliadelimi i skajit 3";
- bashkimi: disa ARN virale që përmbajnë informacion për dy proteina pritet në dy pjesë.
Në këtë mënyrë, sintetizohen ARN plus, të cilat mund të shërbejnë si shabllone për sintezën e proteinave virale dhe ARN-ve virale minus.
Atëherë gjithçka është e thjeshtë: qeliza budalla, duke përdorur ribozomet e veta nga aminoacidet e veta, sintetizon proteinat e virusit, duke përfshirë ARN polimerazën e varur nga ARN. Influenca minus ARN prodhohet gjithashtu fuqishëm brenda bërthamës. Asambleja e grimcave virale ndodh në citoplazmë, në sipërfaqen e brendshme të membranës qelizore. Virusi i përfunduar largohet nga qeliza me ekzocitozë (lulëzim), neuraminidaza kafshon fillin e fundit që lidh qelizën dhe virusin e porsalindur... Një jetë e re (e keqe) e vogël del në botë!
![](https://i0.wp.com/bio-faq.ru/zzz/zzz010_clip_image008.jpg)
oriz. 4
Struktura dhe përbërja kimike
Virusi i influencës ka formë sferike, me diametër 80-120 nm. Format si fije janë më pak të zakonshme. Nukleokapsidi i simetrisë spirale është një fije ribonukleoproteine (RNP) e rregulluar në një spirale të dyfishtë që formon bërthamën e virionit. ARN polimeraza dhe endonukleazat (P1 dhe P3) shoqërohen me të. Bërthama është e rrethuar nga një membranë e përbërë nga proteina M, e cila lidh RNP me një shtresë të dyfishtë lipidike të shtresës së jashtme dhe proceset e stiloidit të përbërë nga hemagglutinina dhe neuraminidaza. Virionet përmbajnë rreth 1% ARN, 70% proteina, 24% lipide dhe 5 % karbohidrate. Lipidet dhe karbohidratet janë pjesë e lipoproteinave dhe glikoproteinave të shtresës së jashtme dhe janë me origjinë qelizore. Gjenomi i virusit përfaqësohet nga një molekulë e fragmentuar e ARN-së me fije minus. Viruset e gripit të tipit A dhe B kanë 8 fragmente ARN. Prej tyre, 5 kodojnë një proteinë dhe 3 të fundit kodojnë dy proteina secila.Antigjenet
Viruset e influencës A, B dhe C ndryshojnë nga njëri-tjetri në antigjenin tip specifik të lidhur me RNP (proteina NP) dhe proteinën e matricës M, e cila stabilizon strukturën e virionit.Këta antigjene zbulohen në RSC. Specifikimi më i ngushtë i virusit të tipit A përcaktohet nga dy antigjenë të tjerë sipërfaqësor - hemagglutinina H dhe neuraminidaza N, të përcaktuara me numra serialë. Hemagglutinina është një glikoproteinë komplekse me veti mbrojtëse. Indukton në trup formimin e antitrupave neutralizues të virusit - antihemaglutininave, të zbuluara në RTGA. Ndryshueshmëria e hemagglutininës (H-antigjen) përcakton zhvendosjen dhe zhvendosjen antigjenike të virusit të influencës. Zhvendosja antigjenike i referohet ndryshimeve të vogla në antigjenin H të shkaktuar nga mutacionet e pikës në gjenin që kontrollon formimin e tij. Ndryshime të tilla mund të grumbullohen tek pasardhësit nën ndikimin e faktorëve selektivë siç janë antitrupat. Kjo përfundimisht çon në një zhvendosje sasiore, e shprehur në një ndryshim në vetitë antigjenike të hemagglutininës. Me zhvendosjen antigjenike, ndodh një zëvendësim i plotë i gjenit, i cili mund të bazohet në rikombinimin midis dy viruseve. Kjo çon në një ndryshim në nëntipin e hemagglutininës ose neuraminidazës, dhe nganjëherë të dy antigjeneve, dhe shfaqjen e varianteve të reja antigjenike të virusit, duke shkaktuar epidemi dhe pandemi të mëdha.Hemagglutinina është gjithashtu një receptor përmes të cilit virusi absorbohet në qeliza të ndjeshme , duke përfshirë qelizat e kuqe të gjakut, duke i bërë ato të ngjiten së bashku dhe është i përfshirë në hemolizën e qelizave të kuqe të gjakut.Neuraminidaza virale është një enzimë që katalizon shkëputjen e acidit sialik nga substrati. Ka veti antigjenike dhe në të njëjtën kohë merr pjesë në çlirimin e virioneve nga qeliza bujtëse. Neuraminidaza, si hemagglutinina, ndryshon si rezultat i zhvendosjes dhe zhvendosjes antigjenike.Kultivimi dhe riprodhimi
Viruset e gripit kultivohen në embrionet e pulave dhe në kulturat e qelizave. Mjedisi optimal janë embrionet e pulës, në zgavrën amniotike dhe alantoike të të cilave virusi riprodhohet brenda 36-48 orëve.Më të ndjeshmet ndaj virusit të gripit janë kulturat primare të qelizave të veshkave embrionale të njeriut dhe disa kafshëve. Riprodhimi i virusit në këto kultura shoqërohet me një CPE të lehtë, që të kujton degjenerimin spontan të qelizave. Viruset e influencës absorbohen në receptorët glikoproteinikë të qelizave epiteliale, në të cilët depërtojnë përmes endocitozës së receptorit. Transkriptimi dhe riprodhimi i gjenomit viral ndodh në bërthamën e qelizës. Në këtë rast, fragmentet individuale të ARN-së të lexuara në formën e m-ARN përkthehen në ribozome, ku ndodh sinteza e proteinave specifike për virusin. Pas replikimit të gjenomit viral, formohet një grup ARN virale, i cili përdoret në montimin e nukleokapsideve të reja.Patogjeneza
Riprodhimi primar i virusit ndodh në qelizat epiteliale të traktit respirator. Nëpërmjet sipërfaqes së gërryer të mukozës, virusi hyn në gjak, duke shkaktuar viremi. Qarkullimi i virusit në gjak shoqërohet me dëmtime të qelizave endoteliale të kapilarëve të gjakut, duke rezultuar në rritjen e përshkueshmërisë së tyre. Në raste të rënda vërehen hemorragji në mushkëri, muskul të zemrës dhe organe të tjera të brendshme. Viruset e gripit, duke hyrë në nyjet limfatike, dëmtojnë limfocitet, duke rezultuar në imunodefiçencë të fituar, e cila kontribuon në shfaqjen e infeksioneve dytësore bakteriale.Me gripin, ndodh dehja e trupit me ashpërsi të ndryshme.Imuniteti
Mekanizmi i imunitetit kundër gripit lidhet me faktorë natyrorë të mbrojtjes jospecifike antivirale, kryesisht me prodhimin e interferonit dhe qelizave vrasëse natyrore.Imuniteti specifik sigurohet nga faktorët e përgjigjes qelizore dhe humorale. Të parët përfaqësohen nga makrofagët dhe T-vrasësit. E dyta janë imunoglobulinat, kryesisht antihemaglutininat dhe antitrupat antineurominidazë, të cilat kanë veti neutralizuese të virusit. Këto të fundit, ndryshe nga antihemaglutininat, neutralizojnë vetëm pjesërisht virusin e gripit, duke parandaluar përhapjen e tij. Antitrupat fiksues të komplementit ndaj nukleoproteinës virale nuk kanë veti mbrojtëse edhe pas 1.5 muajsh. zhduken nga gjaku i konvaleshentëve Antitrupat zbulohen në serumin e gjakut 3-4 ditë pas fillimit të sëmundjes dhe arrijnë titrat maksimalë pas 2-3 javësh. Kohëzgjatja e imunitetit specifik të fituar pas infektimit me grip, në kundërshtim me besimet e mëparshme, matet në disa dekada. Ky përfundim u arrit bazuar në një studim të strukturës moshore të incidencës së gripit të shkaktuar nga virusi A (H1N1) në vitin 1977. U zbulua se ky virus, i cili kishte munguar që nga viti 1957, prekte vetëm personat nën moshën 20 vjeç. në vitin 1977. Kështu, pas pësuar një infeksion gripi të shkaktuar nga virusi i gripit të tipit A, formohet një imunitet intensiv, rreptësisht specifik për nëntipin e virusit (nga antigjenet H- dhe N) që shkaktoi formimin e tij. Përveç kësaj, të sapolindurit kanë imuniteti pasiv për shkak të antitrupave IgG ndaj nëntipit përkatës të virusit A. Imuniteti zgjat 6-8 muaj.Epidemiologjia
Burimi i infeksionit janë njerëzit e sëmurë dhe bartësit e virusit. Transmetimi i patogjenit ndodh me anë të pikave ajrore. Gripi është një infeksion epidemik që shfaqet më shpesh në muajt dimër dhe dimër-pranverë. Përafërsisht çdo dhjetë vjet, epidemitë e gripit shndërrohen në pandemi, duke prekur popullsinë e kontinenteve të ndryshme. Kjo shpjegohet me ndryshimin në antigjenet H- dhe N të virusit të tipit A të shoqëruar me zhvendosjen dhe zhvendosjen antigjenike. Për shembull, virusi i influencës A me hemagglutinin NSW1 shkaktoi pandeminë e gripit spanjoll në vitin 1918, e cila mori 20 milionë jetë njerëzore. Në vitin 1957, virusi "aziatik" i gripit (H2N2) shkaktoi një pandemi që preku më shumë se 2 miliardë njerëz. Në vitin 1968, u shfaq një variant i ri pandemik, virusi i gripit A (H3N2), i quajtur virusi i Hong Kongut, i cili vazhdon të qarkullojë deri në ditët e sotme. Në vitin 1977 iu bashkua virusi i tipit A (H1N1). Kjo ishte e papritur, pasi një virus identik kishte qarkulluar tashmë në vitet 1947-1957 dhe më pas u zëvendësua plotësisht nga nëntipi “Aziatik”. Në këtë drejtim, u ngrit një hipotezë se variantet e zhvendosjes së virusit nuk janë historikisht të reja. Ato përfaqësojnë serosubtipe që qarkullojnë vitet e kaluara.Ndërprerja e qarkullimit të virusit të influencës, që shkaktoi epideminë e radhës, shpjegohet me imunitetin kolektiv të popullatës që është zhvilluar ndaj këtij varianti antigjenik të patogjenit. Në këtë sfond, ekziston një përzgjedhje e varianteve të reja antigjenike, imuniteti kolektiv ndaj të cilëve nuk është formuar ende. Nuk është ende e qartë se ku janë zhvendosur variantet antigjenike (serosubtipe) të virusit të influencës A që ka dalë nga qarkullimi aktiv në një ose një periudhë tjetër historike ruhen për një kohë të gjatë. Është e mundur që rezervuari i qëndrueshmërisë së viruseve të tilla të jenë kafshët e egra dhe shtëpiake, veçanërisht shpendët, të cilët janë të infektuar me variante njerëzore të viruseve të gripit të tipit A dhe ruajnë qarkullimin e tyre për një kohë të gjatë. Në të njëjtën kohë, në trupin e shpendëve ndodhin rikombinime gjenetike midis viruseve të shpendëve dhe atyre të njeriut, të cilat çojnë në formimin e varianteve të reja antigjenike.Sipas një hipoteze tjetër, viruset e gripit të të gjitha nënllojeve të njohura qarkullojnë vazhdimisht në popullatë, por bëhen epidemikisht të rëndësishme. vetëm me ulje të imunitetit kolektiv.Viruset e gripit të tipit B dhe C karakterizohen me qëndrueshmëri më të lartë antigjenike. Viruset e influencës B shkaktojnë epidemi më pak intensive dhe shpërthime lokale. Virusi i influencës tip C është shkaktari i sëmundjeve sporadike. Virusi i gripit shkatërrohet shpejt nga temperaturat mbi 56°C, rrezatimi UV, dezinfektuesit dhe detergjentët. Mbetet i zbatueshëm për 1 ditë. në temperaturën e dhomës, në sipërfaqe të lëmuara metalike dhe plastike - deri në 2 ditë. Viruset e gripit mbijetojnë në temperatura të ulëta (-70°C).Parandalimi specifik
Për parandalimin e gripit përdoret rimantadina, e cila shtyp riprodhimin e virusit të gripit të tipit A. Për parandalimin pasiv përdoret imunoglobulina humane kundër gripit, e marrë nga serumi i gjakut i dhuruesve të imunizuar me vaksinën e gripit. Interferoni i leukociteve njerëzore ka një efekt të caktuar.Për parandalimin e vaksinave përdoren vaksina të gjalla dhe të inaktivuara. Kur administrohen vaksina të gjalla, formohet imuniteti i përgjithshëm dhe lokal. Veç kësaj, vihet re induksioni i interferonit.Aktualisht janë marrë vaksina të inaktivuara të llojeve të ndryshme: virion, subunit, split dhe miks. Vaksinat e Virionit prodhohen nga pastrimi me cilësi të lartë të viruseve të rritura në embrionet e pulës. Vaksinat nën-njësi janë antigjene të pastruara sipërfaqësore të virusit të influencës - hemagglutinina dhe neuraminidaza. Preparate të tilla vaksinash karakterizohen nga reaktogjeniteti i reduktuar dhe imunogjeniteti i lartë. Vaksinat e ndara ose të shpërbëra përgatiten nga një suspension virion i pastruar me trajtim me detergjentë. Megjithatë, ende nuk ka konsensus mbi epërsinë e ndonjërës prej këtyre vaksinave. Vaksinat e inaktivizuara nxisin një përgjigje imune në sistemin e imunitetit humoral të përgjithshëm dhe lokal, por nxisin sintezën e interferonit në një masë më të vogël në krahasim me vaksinat e gjalla Përvoja shumëvjeçare në përdorimin e vaksinave të gjalla dhe të inaktivizuara tregon se mospërputhja antigjenike e shtameve të vaksinave me epidemia është arsyeja kryesore, por jo e vetmja arsye e efektivitetit të ulët të parandalimit të vaksinës së gripit. Vitet e fundit, janë bërë përpjekje për të krijuar vaksina të influencës të modifikuara gjenetikisht dhe sintetike.Gripi
Gripi është një sëmundje akute e frymëmarrjes tek njerëzit që tenton të përhapet në mënyrë epidemike. Karakterizohet nga inflamacioni katarral i rrugëve të sipërme të frymëmarrjes, ethe dhe dehje e përgjithshme e rëndë. Gripi shoqërohet shpesh me komplikime të rënda - pneumoni bakteriale dytësore, përkeqësim të sëmundjeve kronike të mushkërive.Patogjenët e influencës i përkasin familjes Orthomyxoviridae. Ai përfshin tre lloje virusesh - A, B, C. Virusi i influencës ka një formë sferike, madhësia e tij është 80-120 nm. Ndonjëherë formohen virione filamentoze. Gjenomi është formuar nga një ARN minus-vargeshë me një fije, e cila përbëhet nga tetë fragmente dhe është e rrethuar nga një kapsid proteine. ARN e lidhur me 4 proteina të brendshme: nukleoproteinat (NP) dhe proteinat me peshë të lartë molekulare PI, P2, R3, të përfshira në transkriptimin e gjenomit dhe replikimin e virusit. Nukleokapsidi ka një lloj simetrie spirale. Mbi guaskën e kapsidës është një shtresë e proteinës së matricës (proteina M). Në shtresën e jashtme, superkapsidore, hemagglutinina (H) dhe neuraminidaza (N) janë të vendosura në formën e gjembave. Të dy glikoproteinat (N dhe H) kanë veti të theksuara antigjenike. Në viruset e influencës janë gjetur 13 lloje të ndryshme antigjenike të hemagglutininës (NI-13) dhe 10 variante të neuraminidazës (N1-10).Në bazë të antigjenit të brendshëm nukleoproteinik dallohen tre lloje të viruseve të influencës - A, B, C, të cilët. mund të përcaktohet në RSC. Viruset e tipit A që infektojnë njerëzit kanë tre lloje hemagglutinine (HI, H2, H3) dhe dy neuraminidaza (N1, N2). Në varësi të kombinimeve të tyre, dallohen variantet e viruseve të influencës A - H1N1, H2N2, H3N2. përcaktohen në reaksionin e frenimit të hemaglutinimit me serumet përkatëse.Viruset e influencës kultivohen lehtësisht në embrionet e pulës dhe në kultura të ndryshme qelizore. Akumulimi maksimal i viruseve ndodh pas 2-3 ditësh. Në mjedisin e jashtëm, virusi humbet shpejt infektivitetin e tij duke u tharë. Në temperatura të ulëta në frigorifer ruhet për një javë, në -70 ° C - shumë më gjatë. Ngrohja e bën atë të çaktivizohet pas disa minutash. Nën ndikimin e eterit, fenolit, formaldehidit, ai shkatërrohet shpejt.Metoda e diagnostikimit virologjik
Materiali për hulumtim janë tamponët nga nazofaringu, rrjedhja e hundës, e cila merret me shtupë pambuku steril të thatë ose të lagësht në ditët e para të sëmundjes, sputum. Viruset mund të gjenden në gjak dhe lëngun cerebrospinal. Në rastet fatale hiqen copa të indeve të prekura të rrugëve të sipërme dhe të poshtme respiratore, trurit etj.Tamponët nazofaringeal merren me stomakun bosh. Pacienti duhet të bëjë gargarë tre herë me solucion steril të kripur të klorurit të natriumit (10-15 ml), i cili mblidhet në një kavanoz steril me qafë të gjerë. Pas kësaj, fshijeni murin e pasmë të faringut dhe pasazhet e hundës me një copë leshi pambuku steril, më pas zhyteni në një kavanoz me shpëlarje.Mund ta merrni materialin me një shtupë sterile të lagur në një tretësirë të klorurit të natriumit, e cila përdoret për të fshijeni tërësisht murin e pasmë të faringut. Pas grumbullimit të materialit, tamponi zhytet në një epruvetë me tretësirë fiziologjike, së cilës i shtohet 5% serum kafshësh i inaktivizuar. Në laborator, tamponët shpëlahen në lëng, shtrydhen në anën e tubit dhe hiqen. Kullimi mbahet në frigorifer për t'u vendosur, pastaj pjesa e mesme e lëngut mblidhet në tuba sterilë. Antibiotikët penicilinë (200-1000 IU/ml), streptomicinë (200-500 μg/ml), nistatin (100-1000 IU/ml) i shtohen materialit për të shkatërruar mikroflorën shoqëruese, ruhen për 30 minuta në temperaturën e dhomës dhe përdoren për të. izoloni viruset.pasi e keni kontrolluar më parë për sterilitet Një metodë e ndjeshme për izolimin e viruseve që infektojnë embrionet e pulës 10-11 ditëshe. Materiali në një vëllim prej 0,1-0,2 ml injektohet në zgavrën amniotike ose allantois. Si rregull, infektohen 3-5 embrione. Embrionet inkubohen në një temperaturë optimale prej 33-34 ° C për 72 orë. Për të rritur numrin e virioneve në materialin e provës, ai është i para-koncentruar. Për ta bërë këtë, ata përdorin metoda të adsorbimit të viruseve në qelizat e kuqe të gjakut të pulës, trajtimin me një tretësirë të tripsinës 0,2% për të rritur vetitë infektive të viruseve ose për t'i precipituar ato duke përdorur metoda speciale. Pas inkubimit, embrionet e pulës ftohen në temperaturë 4°C për 2-4 orë, më pas thithet me steril me pipeta ose shiringë, lëng alantoik ose amniotik. Në këtë rast, prania e një virusi infektiv përcaktohet duke përdorur RGA. Për ta bërë këtë, përzieni vëllime të barabarta (0,2 ml) të materialit rezistent ndaj virusit dhe 1% pezullim të qelizave të kuqe të gjakut të pulës. Një reaksion pozitiv (prania e një virusi në material) tregohet nga sedimentimi i eritrociteve në formën e një ombrellë.Nëse në material ka një virus që ka veti hemaglutinoze, ai titrohet duke përdorur një RGA të zgjeruar, duke përcaktuar titri i aktivitetit hemaglutinoz. Duke përdorur këtë reaksion, përcaktohet titri i virusit hemaglutinues - hollimi më i lartë i materialit që ende jep reaksionin e hemaglutinimit. Kjo sasi virusi merret si një njësi hemaglutinoze (HAU).Identifikimi i viruseve të gripit duke përdorur RTGA
Për ta bërë këtë, fillimisht përgatitet një hollim pune i materialit viral, i cili përmban 4 GAO të virusit në një vëllim të caktuar.Reaksioni merret parasysh pas formimit të një sedimenti të eritrociteve në puset e kontrollit. Një reagim pozitiv tregohet nga një vonesë në hemaglutinimin në puset e testimit.Viruset e influencës mund të izolohen duke përdorur linja të ndryshme të kulturës qelizore - embrioni i njeriut, veshkat e majmunit, linja e vazhdueshme e qelizave të veshkave të qenit (MDCK) dhe të tjera. Në kulturat qelizore manifestohet efekti citopatik i viruseve (paraqitja e qelizave me buzë të gërshetuara, vakuola, formimi i përfshirjeve intranukleare dhe citoplazmike), i cili përfundon me degjenerimin e monoshtresës qelizore. Për të identifikuar viruset e izoluar përdoret RTGA. (me kusht që titri i hemaglutininës në lëngun e kulturës të jetë së paku 1:8). Përveç këtij reagimi, ju mund të përdorni RGGads, megjithatë, ai është më pak i ndjeshëm dhe kërkon një titër të serumit imunitar prej të paktën 1:160 si dhe RSK, RN, REMA, etj.Studim serologjik
Testet serologjike përdoren për të konfirmuar diagnozën e gripit. Ai bazohet në përcaktimin e një rritjeje katërfish të titrit të antitrupave në serumin e pacientit. Serumi i parë merret në fillimin e sëmundjes në periudhën akute (2-5-1 ditë të sëmundjes), i dyti - pas 10- Dita e 14-të e sëmundjes. Meqenëse serumet mund të përzihen në të njëjtën kohë, i pari prej tyre ruhet në frigorifer në një temperaturë prej -20 ° C. Më shpesh përdoren RTGA, RSK, RNGA. Këto reaksione kryhen me grupe të veçanta të diagnostikimit standard viral (shtameve referuese të virusit të influencës të llojeve të ndryshme serologjike). Meqenëse serumet e pacientëve mund të përmbajnë frenues të hemaglutinimit jospecifik, ato fillimisht nxehen në një temperaturë prej 56 ° C dhe trajtohen gjithashtu me një enzimë të veçantë (për shembull, neuraminidazë) ose zgjidhje të periodatit të kaliumit, rivanolit, klorurit të manganit, suspensionit të gomave të bardha, etj. sipas skemave të veçanta. DHEReagimi i frenimit të hemaglutinimit
Reaksioni i frenimit të hemaglutinimit mund të kryhet në epruveta (makromsh tod) ose në pllaka të posaçme për studime imunologjike.Reaksioni konsiderohet pozitiv kur krijohet një sediment kompakt, i dendur i rruazave të kuqe të gjakut me buzë të lëmuara.Diagnostifikimi i shprehur
Metoda bazohet në identifikimin e antigjeneve specifike virale në materialin e testimit duke përdorur imunofluoreshencën në RIF direkt ose indirekt. Mukusi merret nga pasazhet e hundës ose muri i pasmë i faringut, centrifugohet dhe përgatiten njolla në rrëshqitës xhami nga sedimenti i qelizave epiteliale kolone të mukozës. ato trajtohen me serume imunofluoreshente të konjuguara me fluorokrome, për shembull, FITC (izotiocianat fluorescein). Gjatë ekzaminimit të barnave duke përdorur mikroskop fluoreshent, vërehet një shkëlqim karakteristik i verdhë në të gjelbër të viruseve të influencës, të cilët lokalizohen në fillimin e sëmundjes në bërthamat e qelizave epiteliale.Kohët e fundit është propozuar përdorimi i ELISA, RZNGA dhe PCR. për të treguar antigjene specifike virale.Ata janë parazitë të detyrueshëm ndërqelizor, që do të thotë se ata nuk mund të përsëriten ose të kalojnë gjenet e tyre pa ndihmë. Një grimcë e vetme virale (virion) është në vetvete inerte. Kur një virus infekton një qelizë, ai përdor enzimat dhe pjesën më të madhe të strukturës së qelizës për t'u shumuar.
Ndryshe nga ajo që shohim në proceset e ndarjes së qelizave si dhe, riprodhimi i virusit prodhon shumë pasardhës që shkatërrojnë qelizën pritëse dhe më pas infektojnë qelizat e tjera në trup.
Materiali gjenetik viral
Viruset mund të përmbajnë ADN ose ARN me një zinxhir/dyvargësh. Lloji i materialit gjenetik që gjendet në një virus të caktuar varet nga natyra dhe funksioni i tij. Natyra e saktë e asaj që ndodh pasi një bujtës është infektuar ndryshon në varësi të natyrës së virusit.
Procesi i riprodhimit do të jetë i ndryshëm për viruset dsDNA, ssDNA, dsRNA dhe ARN me një varg. Për shembull, viruset e ADN-së me dy zinxhirë zakonisht duhet të hyjnë në qelizat pritëse përpara se të mund të shumohen. Sidoqoftë, viruset e ARN-së me një zinxhir replikohen kryesisht në qelizat pritëse.
Sapo një virus infekton një bujtës, përbërësit e pasardhësve viralë prodhohen nga makineri qelizore dhe montimi i kapsidës virale është një proces jo enzimatik. Viruset zakonisht mund të infektojnë vetëm një numër të kufizuar të hostëve. Mekanizmi "kyçe dhe çelës" është shpjegimi më i zakonshëm për këtë fenomen. Disa proteina në grimcat e virusit duhet të përputhen me disa proteina të receptorit në sipërfaqen qelizore të një bujtësi të caktuar.
Si i infektojnë viruset qelizat?
Procesi themelor i infektimit dhe riprodhimit të virusit ndodh në 6 faza:
- Adsorbimi - virusi lidhet me qelizën pritëse.
- Hyrja - virusi fut gjenomin e tij në qelizën pritëse.
- Replikimi i gjenomit viral - Gjenomi viral replikohet duke përdorur strukturën qelizore të bujtësit.
- Asambleja - përbërësit viralë dhe enzimat formohen dhe fillojnë të grumbullohen.
- Maturimi - viruset zhvillohen nga komponentët e montuar.
- Dalje - viruse të reja shpërthejnë nga qeliza pritëse në kërkim të viktimave të reja për t'u infektuar.
Viruset mund të infektojnë çdo lloj qelize, duke përfshirë